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质粒酶切回收(酶切后质粒回收效率低)

文章发布时间:2019-11-30 12:11:24
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酶切后质粒回收效率低

  1. 可能是酶切过程中DNA降解了,如果是双切下来的片段很淡,可以看看切了多大的一段,太小的话容易弥散,或者没切开。

  2. 双酶切省事,但是每次效率都很低,还不如单切后回收,再切一次来的好,多费不了2个小时。

  3. 质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子。

  4. 质粒zhìlì(Plasmid)是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子(即细胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的质粒虽然都是环状构型,它存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,乃至于植物的线粒体等胞器中。然而,1984年,在Streptomyces coelicoler(天蓝色链霉菌)等放线菌以及在Borrelia hermsii(赫氏蜱疏螺旋体)等原核生物中,又相继发现线形质粒。

酶切后可以不用胶回收么

需要,被切掉的部分同样带有粘性末端(因为粘性末端的碱基互补),会干扰目的片段与载体连接。
如果不想用胶回收方法纯化,可以选择吸附柱过滤除掉被切掉的小分子片段。
胶回收纯化的好处是直观的判断酶切实验结果是否理想,是否酶切完全,胶回收可以避免收集不完全酶切的质粒片段(包括完整的环状质粒和线性质粒)等等。

质粒酶切后什么也没有

第一,酶切没有切过夜的说法,你去查一下说明书,1ug的标准DNA酶切1小时是1活力单位,一般的活力正常的酶,20ul体系加0.5ul酶,切1小时已经足够切开大部分DNA,只有酶连是需要过夜的
第二,很有可能你的酶切体系内污染了DNA酶,而且你切这么久,只要有少量DNA酶存在,切过夜绝对把你的质粒全部切散
酶切过夜应该不是问题,我们实验室做过,都有条带,可能是你的酶或者buffer被污染了吧,要不不可能出现这状况啊

质粒回收英语

Gel Extraction Kit
Plasmid Extraction Kit
每家公司都有自己的命名 这哪有什么标准的 写啥老外都能看懂

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